hplc 故障及排除方法
诊状
可能的原因
解 决 方 法
（ 一 ）
保留时间变化
1. 柱温变化
柱恒温
2. 等度与梯度间未能充分平衡
至少用 10 倍柱体积的流动相平衡柱
3. 缓冲液容量不够
用 >25mmol/l 的缓冲液
4. 柱污染
每天冲洗柱
5. 柱内条件变化
稳定进样条件 , 调节流动相
6. 柱快达到寿命
采用保护柱
（ 二 ）
保留时间缩短
1. 流速增加
检查泵 , 重新设定流速
2. 样品超载
降低样品量
3. 键合相流失
流动相 ph 值保持在 3~7.5 检查柱的方向
4. 流动相组成变化
防止流动相蒸发或沉淀
5. 温度增加
柱恒温
（ 三 ）
保留时间延长
1. 流速下降
管路泄漏 , 更换泵密封圈 , 排除泵内气泡
2. 硅胶柱上活性点变化
用流动相改性剂 , 如加三乙胺 , 或采用碱至钝化柱
3. 键合相流失
同前 （ 二 ）3
4. 流动相组成变化
同前 （ 二 ）4
5. 温度降低
同前 （ 二 ）5
（ 四 ）
出现肩峰或分叉
1. 样品体积过大
用流动相配样 , 总的样品体积小于*峰的 15%
2. 样品溶剂过强
采用较弱的样品溶剂
3. 柱塌陷或形成短路通道
更换色谱柱 , 采用较弱腐蚀性条件
4. 柱内烧结不锈钢失效
更换烧结不锈钢 , 加在线过滤器 , 过滤样品
5. 进样器损坏
更换进样器转子
（ 五 ）
鬼峰
1. 进样阀残余峰
每次用后用强溶剂清洗阀 , 改进阀和样品的清洗
2. 样品中未知物
处理样品
3. 柱未平衡
重新平衡柱 , 用流动相作样品溶剂 （ 尤其是离子对色谱 ）
5. 水污染 （ 反相 ）
通过变化平衡时间检查水质量,用 hplc 级的水
（ 六 ）
基线噪声
1. 气泡 （ 尖锐峰 ）
流动相脱气 , 加柱后背压
2. 污染 （ 随机噪声 ）
清洗柱 , 净化样品 , 用 hplc 级试剂
3. 检测器灯连续噪声
更换氘灯
4. 电干扰 （ 偶然噪声 ）
采用稳压电源 , 检查干扰的来源 （ 如水浴等 ）
5. 检测器中有气泡
流动相脱气 , 加柱后背压
（ 七 ）
峰拖尾
1. 柱超载
降低样品量 , 增加柱直径采用较高容量的固定相
2. 峰干扰
清洁样品 , 调整流动相
3. 硅羟基作用
加三乙胺 , 用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相 ph 值 , 钝化样品
4. 同前 （ 四 ）4
同前 （ 四 ）4
5. 同前 （ 四 ）3
5. 同前 （ 四 ）3
6. 死体积或柱外体积过大
连接点降至zui低 , 对所有连接点作合适调整 , 尽可能采用细内径的连接管
7. 柱效下降
用较低腐蚀条件 , 更换柱 , 采用保护柱
（ 八 ）
峰展宽
1. 进样体积过大
同 （ 四 ）1
2. 在进样阀中造成峰扩展
进样前后排出气泡以降低扩散
3. 数据系统采样速率太慢
设定速率应是每峰大于 10 点
4. 检测器时间常数过大
设定时间常数为感兴趣*峰半宽的 10%
5. 流动相粘度过高
增加柱温 , 采用低粘度流动相
6. 检测池体积过大
用小体积池 , 卸下热交换器
7. 保留时间过长
等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱
8. 柱外体积过大
将连接管径和连接管长度降至zui小
9. 样品过载
进小浓度小体积样品