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PolyPlus FectoPRO产品

2019/10/16 17:14:46发布205次查看
 
polyplus-transfection(pt)是一家位于法国的生物技术公司,目前已经通过了iso9001:2000质量体系认证。该公司拥有十几年的的转染试剂研发经验,已经开发了一系列的转染试剂,如:基因的体内和体外转染试剂、寡核苷酸转染试剂和sirna转染试剂等,可以根据不同的需要获得稳定或瞬时的转染效果
polyplus fectopro产品high yields in suspension cho & hek-293惊人的蛋白质和抗体产量使用较少的质粒dna量进行具有成本效益的瞬时基因表达与多种哺乳动物表达培养基和细胞系统兼容符合生物制造准则适用于高密度电池系统技术指标试剂fectopro ®
分子交付脱氧核糖核酸
应用领域生物生产
细胞类型悬浮液cho,hek-293及其衍生物
转染数1毫升fectopro的®足以转染800毫升到1升以上的细胞培养的
存储5°c±3°c,适当存放可稳定1-2年
提供fectopro ®助推器
摘要首次使用瞬时转染和基因表达获得卓越的蛋白质产量。
fectopro®转染试剂盒专门设计用于使用低dna量(<1 µg / ml细胞培养物)在各种无血清培养基中的cho和hek-293悬浮细胞中增强瞬时基因表达(tge)。
fectopro®介导的转染过程可轻松扩展至几毫升到几升的细胞培养,确保强大的可重复生产蛋白质。更高的生产率和对dna的低要求使fectopro®成为生物生产过程中具有成本效益的解决方案。
订购信息:
productreference numbertransfection reagentexpression boosterexpression medium
fectopro® reagent 116-001 1 ml 1 ml -
fectopro® reagent 116-010 10 ml 10 ml -
fectopro® reagent 116-040 4 x 10 ml 4 x 10 ml -
fectocho® cd medium 716-01l - - 1 l
fectocho® cd medium 716-06l - - 6 x 1 l
fectocho® expression system 716-01lkit 1 ml 1 ml 1 l
fectocho® expression system 716-06lkit 5 x 1 ml 5 x 1 ml 6 x 1 l
惊人的蛋白质产量fectopro ®使惊人的高蛋白质和抗体的产率在两个cho和hek-293细胞在无血清培养基中悬浮培养的(图1)。
图1 fectopro ®给出了在悬浮的cho细胞惊人抗体生产产量。将细胞以1×106细胞/ ml的30ml的freestyle™cho表达培养基中接种,并用fectopro染®(0.8微克dna / ml)或的freestyle™max试剂(1.25微克dna / ml)的下列推荐的方案针对各个试剂。重组小鼠igg产率,使用蛋白g的生物传感器(福特生物转染后1〜6天测定®八位字节red96系统)。freestyle™是life technologies™corporation的商标。数据由proteogenix sas(法国)友善提供。
了解我们的套件致力于cho细胞:fectocho ®表达系统
fectopro ®很大程度上优于其它转染试剂如线性pei在生物生产过程中常用的转染效率(图2)而言,导致优异的蛋白质生产产率(图3)。
图2 fectopro ®给出了在悬浮的cho细胞转染效率高。的freestyle™cho-s细胞以1×10接种6个细胞/ ml的30ml的freestyle™cho表达培养基中,并用fectopro转染® + fectopro ®使用0.4微克/毫升和1.25微克/毫升的助推器或的freestyle™max试剂表达gfp的质粒。转染24小时后,使用荧光显微术测定gfp表达。
图3 fectopro ®给出在悬浮液中的cho和hek-293细胞优于蛋白质生产的产率。的freestyle™cho-s和hek-293f细胞以1×10接种6个细胞/ ml的30ml的freestyle™cho或293表达培养基并用fectopro转染® + fectopro ®助推器(0.4微克dna /毫升),自由式™ max试剂(1.25微克dna / ml)或peipro ®(1个微克dna /毫升)以下推荐的协议用于相应的试剂。在转染后72小时(cho细胞)和120小时(hek-293细胞),通过蛋白g亲和定量(hplc)和western blot测定igg3-fc(34kda)的产生。标准对应于纯化的igg3-fc(34 kda)。
了解我们的套件致力于cho细胞:fectocho ®表达系统
经济高效:使用少量质粒dna高质量质粒dna的制备可能非常昂贵,尤其是在大量dna大量生产大量蛋白质需要大量质粒的情况下。fectopro ®节省40〜60%的dna成本通过使用0.4至0.6微克dna / 10 6个细胞/ ml的细胞培养物; 因此,使该套件成为生物生产过程中可承受且经济的解决方案。
表1 dna的量和试剂(fectopro的体积®和竞争对手)根据生产商的建议转染。
持续的蛋白质生产蛋白质生产过程的持续时间在过去几年中有所增加,现在大多数蛋白质生产过程会持续1-2周,以获得最宜量的蛋白质生产。fectopro ®已经发展到保证持续生产蛋白质在几天内,同时保持较高的细胞活力,可以长期保存蛋白生产(图4)。
图4 fectopro ®给出了在悬浮细胞持续蛋白质生产。的freestyle™hek-293f细胞以1×10 6个细胞/ ml的30毫升的freestyle™293表达培养基的接种,并用fectopro转染® + fectopro ®按照标准方案助推器(0.5微克dna /毫升)中。在不同的时间点后,通过蛋白g亲和定量(hplc)测定igg3-fc的产生。freestyle™cho-s可获得类似的结果(数据未显示)。
轻松扩展强大的协议可轻松适应各种培养皿,从而简化您的生物生产过程。fectopro ®介导的转染,可以线性地从30毫升放大到升细胞培养物的无协议适配(图5)。
图5 fectopro ®是在cho细胞中易于扩展和重现的。的freestyle™cho-s细胞以1×10接种6个细胞/ ml在30毫升100毫升300毫升或1升的freestyle™cho表达培养基中,并用fectopro转染® + fectopro ®助推器(0.5微克dna / ml)的。在第1至6天,使用台盼蓝排除法(a)测定细胞活力,并通过蛋白g亲和定量(hplc)(b)和western blot(c)测定igg3-fc的产生。标准品(c)对应于纯化的igg3-fc(34 kda)。
可重复生产的产量fectopro ®制造和使用配制高度控制生产过程。这样可确保实验之间的结果均具有高度可重复性。此外,为了满足当前的管理指南,fectopro ®使用释放先进的质量控制包括用于蛋白质生产率的规范,保证优良批与批之间的一致性(图6)。
图6. fectopro ®提供优异的批与批的重现。悬浮cho细胞以1×10接种6个细胞/ ml在30ml cho培养基中,并使用3个不同批次fectopro的转染®(cciii 078,cciii 104或cciii 106)按照标准方案。转染72小时后,通过蛋白g亲和力定量测定igg3-fc的产生。在悬浮的hek-293细胞上获得了相似的结果(数据未显示)。
与哺乳动物表达系统兼容不像其它可商购的试剂,fectopro ®转染试剂盒是适合于cho和hek-293细胞(图2和3)。该试剂与各种培养基配方兼容; 因此,实验室的实施非常简单明了(图7,表2)。
图7 fectopro ®给出了在不同培养基中生长的悬浮的cho细胞优于蛋白质生产的产率。cho细胞以1×10接种6个细胞/ ml的30ml的freestyle™cho表达培养基中,cd cho培养基或pro-cho™4培养基并用fectopro转染® + fectopro ®助推器或的freestyle™max试剂以下对推荐的方案各自的试剂。转染72小时后,通过蛋白g亲和定量(hplc)测定igg3-fc的产生。
使用fectopro表2蛋白质产量®在不同培养基中的cho细胞。
使用fectopro表3.蛋白质产量®在不同培养基中于hek-293细胞。
发现我们的套件致力于cho细胞:fectocho ®表达系统
自由式tm,cd forticho tm,cd的opticho tm,expi293 tm,expicho tm和cd293是gibco公司的商标®。
pro-cho tm,powercho tm和pro293 tm是lonza tm group的商标。
hyclone tm,hycell tm和transfx tm是ge healthcare tm的商标。
balancd ®和transfectory tm是irvine scientific公司的商标tm。
fectopro ®也非常适合病毒生产。

上海起发实验试剂有限公司
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